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        C6細胞大鼠腦膠質瘤 操作說明

        發布時間:2016-02-16瀏覽:2099次

        C6細胞大鼠腦膠質瘤 操作說明

        C6細胞簡介:

        產品名稱:C6細胞

        中文名稱:大鼠腦膠質瘤

        來源:大鼠腦 膠質瘤細胞

        細胞形態:上皮樣

        生長狀態:貼壁生長

        培養基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

        培養條件:37℃ 5% CO2

        消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA 溶液,消化 5-10min

        傳代比例:1:2-1:3

        換液時間:2-3 天換液一次

        凍存液比例:85%培養基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

        凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

        C6細胞大鼠腦膠質瘤 操作說明

        懸浮生長細胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養上清液,用新鮮培養液懸浮細胞,1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續培養。

         

        貼壁生長細胞的傳代:吸去培養液,用PBS洗滌細胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細胞開始脫落時,倒去消化液,加入新鮮培養液,懸浮和吹打分散細胞。也可以待細胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養液懸浮細胞。1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續培養。

        2)細胞株的凍存:

        1. 取培養2~3天生長旺盛的細胞,用細胞培養液將細胞配成2×106~2×107/ml。

        2. 在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時,-20℃ 2小時,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

        3)細胞株的復蘇:復蘇時,從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細胞。將細胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養箱中培養。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養液,繼續培養;帖壁細胞則培養2~3小時,待細胞帖壁后,倒去培養液,更換新鮮的上述培養液,繼續培養。也可以在加入新鮮培養液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養液,繼續培養。

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        以Hyclone為例,主要供應的血清主要有:

        SV30087.02  500ML   南美源  適合一般細胞,普通腫瘤細胞

        SH30084.03  500ML   澳洲源  適合嬌貴細胞的培養

        SH30396.03  500ML   加拿大  適合嬌貴細胞的培養

        SH30070.03  500ML   北美    適合嬌貴及干細胞

        SH30071.03  500ML   北美    優等級別

        SH30370.03  500ML   北美    標準型

        SH30406.02  500ML   新西蘭  適合一般細胞,普通腫瘤細胞

        SH30406.02M 500ML   新西蘭  干細胞

        SH30084.03M 500ML   澳洲源  干細胞

        SH30406.02E 500ML   新西蘭  胚胎干細胞

        SH30084.03E 500ML   澳洲源  胚胎干細胞

        SH30070.03E (帶紅色標簽)  500ML   北美    干細胞

        SH30068.03  500ML   美國    碳吸附血清

        SH30068.03HI    500ML   美國    碳吸附,滅活

        SH30118.03  500ML   北美    新生牛

        SH30074.03  500ML   美國    馬血清

        SH30074.03HI    500ML   美國    熱滅活馬血清

         

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